反转录pcr产物结果分析(反转录pcr引物设计)
导读 首先,要看你的目的。如果你只是做鉴定,或者做reverse real-time PCR定量,那么扩增的片段最好是100-300bp,显然这不是全长的。而该片段...
首先,要看你的目的。
如果你只是做鉴定,或者做reverse real-time PCR定量,那么扩增的片段最好是100-300bp,显然这不是全长的。
而该片段的要求是要保守。
2、看来你是新手,我的建议是在pubmed上查文献,肯定有人用过,关键词是ACE2、real-time pcr或quantitative pcr,当然还有Rat。
3、最后再回到ncbi的genebank,用你得到的引物去检索,核对下序列是否完全正确。
有时老外的资料也是有错的 相对定量PCR。
引物设计有一定要求,片段长度已经说了,同时要做一个看家基因做对照(如果用Delta Delta Ct的方法更是必须的)。
看家基因有beta-actin、GAPDH、Glubin、ABL等。
文献中有些现成的引物,我可以用引物来检索目的基因么? 当然,从经验看,国内的文献经常错,所以必须要再次确认。
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